植物激素脫落酸（ABA）在蘋(píng)果種子萌發(fā)和幼苗早期發(fā)育過(guò)程中起著重要作用，是影響蘋(píng)果產(chǎn)量和質(zhì)量的重要因素之一。WRKY家族是植物中*的轉(zhuǎn)錄因子家族之一，在ABA信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著重要作用。2019年6月1日，Horticulture Research在線發(fā)表了山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金教授研究組題為“The MdWRKY31 transcription factor binds to the MdRAV1 promoter to mediate ABA sensitivity”的論文，初步揭示了蘋(píng)果WRKY轉(zhuǎn)錄因子響應(yīng)ABA的分子機(jī)制。

　　該研究通過(guò)RNA-seq測(cè)序技術(shù)，分析了受ABA誘導(dǎo)的相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果顯示，MdWRKY31的表達(dá)水平明顯升高。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量分析發(fā)現(xiàn)，MdWRKY31還受到模擬干旱PEG4000的誘導(dǎo)。不同物種的蛋白序列比對(duì)顯示MdWRKY31位于IIb組。此外，研究還表明MdWRKY31作為轉(zhuǎn)錄因子定位在細(xì)胞核中。將MdWRKY31在擬南芥、煙草、蘋(píng)果中過(guò)量表達(dá)，發(fā)現(xiàn)MdWRKY31能提高植株對(duì)于ABA的敏感性。此外，通過(guò)NBT染色、MDA含量、相對(duì)失水率、葉綠素含量以及ABA相關(guān)基因的表達(dá)分析，證實(shí)了MdWRKY31通過(guò)調(diào)控這些生理指標(biāo)和相關(guān)基因表達(dá)水平參與ABA信號(hào)途徑。為了進(jìn)一步探究MdWRKY31調(diào)節(jié)蘋(píng)果對(duì)ABA敏感性的分子機(jī)制，檢測(cè)MdWRKY31轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果中ABA信號(hào)相關(guān)基因的表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)眾多基因發(fā)生了上調(diào)和下調(diào)，其中MdRAV1和MdRAV2表達(dá)水平在轉(zhuǎn)基因蘋(píng)果中明顯受到抑制。通過(guò)EMSA、酵母單雜交、Chip-PCR和GUS染色等實(shí)驗(yàn)證明了MdWRKY31能結(jié)合到MdRAV1的啟動(dòng)子上抑制其轉(zhuǎn)錄。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)表明MdRAV1可以結(jié)合到MdABI3和MdABI4的啟動(dòng)子上抑制其表達(dá)進(jìn)而參與ABA信號(hào)途徑。

　　西北農(nóng)林科技大學(xué)趙先炎博士為論文*作者，山東農(nóng)業(yè)大學(xué)郝玉金教授和李媛媛副教授為通訊作者。該研究得到了國(guó)家自然科學(xué)基金和山東省自然科學(xué)基金優(yōu)青項(xiàng)目的資助。

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