近日，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京畜牧獸醫(yī)研究所寵物疫病防控科技創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)利用反向遺傳技術(shù)，在國(guó)際上*成功構(gòu)建了貓細(xì)小病毒和豬細(xì)小病毒的感染性克隆，建立了一種快速構(gòu)建豬細(xì)小病毒全長(zhǎng)感染性克隆的方法。該研究為今后細(xì)小病毒疫苗的研發(fā)提供了良好的載體平臺(tái)，也為其它細(xì)小病毒成員全基因組的構(gòu)建提供了思路，開(kāi)拓了一條新途徑。相關(guān)研究成果在線發(fā)表在《病毒學(xué)文獻(xiàn)（Archives of Virology》上。

　　近年來(lái)，豬細(xì)小病毒感染呈擴(kuò)大上升趨勢(shì)，給全球養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。豬細(xì)小病毒是引起豬繁殖障礙的主要病原之一，感染的主要對(duì)象是孕豬，特別是懷孕前的初產(chǎn)母豬，能夠引起懷孕母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、胎兒木乃伊化等，而母體通常缺乏臨診癥狀。

　　該團(tuán)隊(duì)首先利用人工基因合成的方法將豬細(xì)小病毒（BQ分離株）構(gòu)建到改造后的pBlueScript II SK載體上，再利用PCR擴(kuò)增豬細(xì)小病毒基因組的中間編碼區(qū)序列，并進(jìn)行同義突變，形成限制性內(nèi)切酶切位點(diǎn)，*后通過(guò)無(wú)縫克隆技術(shù)，構(gòu)建成豬細(xì)小病毒質(zhì)粒，利用特異性引物和限制性內(nèi)切酶對(duì)篩選的克隆質(zhì)粒進(jìn)行分析和驗(yàn)證，將驗(yàn)證正確的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染進(jìn)PK-15細(xì)胞中，進(jìn)行感染性克隆病毒的拯救，*終成功拯救出包含豬細(xì)小病毒全基因組（攜帶遺傳標(biāo)記限制性內(nèi)切酶）的感染性克隆病毒。

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