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翻出病毒“家底” 畜禽白血病有了克星(圖)
農(nóng)業(yè)網(wǎng)   時間:2019/3/1 10:25:00  來源:科技日報  閱讀數(shù):393

畜禽

  對畜禽行業(yè)來說,白血病的爆發(fā)不啻于一場“浩劫”:我國花巨資購入的艾維因品系白羽肉種雞此前本已實現(xiàn)了自繁自養(yǎng),但因感染禽白血病而完全退出市場,從此完全依賴進(jìn)口;更嚴(yán)重的是,國內(nèi)自繁自養(yǎng)的蛋雞、黃羽肉雞等原種雞群也大批量感染了禽白血?。簧踔猎诎l(fā)病高峰期,每年至少有6千萬只商品代蛋雞死亡,涉及國內(nèi)三分之二種雞公司的后代,年損失約45億元。

  形勢逆轉(zhuǎn)是從一種被稱為“克星”的新技術(shù)開始的。近日,我們走入河北大午農(nóng)牧集團(tuán)種禽有限公司雞舍,和總經(jīng)理劉平聊起了這個企業(yè)與禽白血病的“戰(zhàn)斗”過程。“現(xiàn)在有了禽白血病診斷和凈化技術(shù),禽白血病病毒在經(jīng)營的蛋雞原種雞群中實現(xiàn)了徹底凈化,再也不用擔(dān)驚受怕了。”劉平開心地說。

  這項由山東農(nóng)業(yè)大學(xué)自主研發(fā)的禽白血病診斷和凈化技術(shù),現(xiàn)已應(yīng)用于眾多養(yǎng)殖企業(yè),從源頭切斷了疾病的傳播。目前,該診斷檢測技術(shù)被中國農(nóng)業(yè)大學(xué)、中國農(nóng)科院、農(nóng)業(yè)部獸醫(yī)診斷中心等從事禽白血病研究的高校和科研機(jī)構(gòu)采用,通過檢疫切斷白血病傳播的防控模式在我國65%的祖代白羽肉雞和60%的祖代蛋雞中推廣應(yīng)用,取得了巨大的經(jīng)濟(jì)社會效益。

  找出發(fā)病“元兇”

  “美國多年前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了禽白血病,我國的白羽肉雞幾乎都由美國進(jìn)口。當(dāng)時我們就判斷,我國的白羽雞得的病可能就是禽白血病。”山東農(nóng)業(yè)大學(xué)崔治中教授表示。

  事實證明,崔治中的推斷是正確的。崔治中團(tuán)隊在我國白羽肉雞中率先分離鑒定了J亞群禽白血病病毒(以下簡稱J病毒),并找到了有關(guān)基因組上可追溯來源的分子標(biāo)志,證實了該病毒來自美國。這也讓國內(nèi)有關(guān)公司的種禽國際貿(mào)易糾紛談判有了科學(xué)依據(jù)。

  經(jīng)過深入研究,團(tuán)隊還發(fā)現(xiàn)J病毒是我國雞群白血病的主要病因。在發(fā)病嚴(yán)重的年份,我國所有白羽快大型肉雞群普遍發(fā)生J病毒感染,并且約70%市場份額的蛋雞種業(yè)公司被投訴。

  針對該病毒的傳播原理,崔治中科普道,橫向傳播,指病毒在人群中不同個體間的傳播,在特定條件下也可直接進(jìn)入血循環(huán);垂直傳播,指通過胎盤或產(chǎn)道,病毒直接由親代傳播給子代的方式,“而禽白血病是由禽白血病病毒(ALV)引起的腫瘤病,以垂直傳播為主,但又能橫向傳播,也就是種雞感染禽白血病后會傳給數(shù)量巨大的商品代雛雞,又能在孵化期時橫向傳播給其他剛出殼的小雞。按照理論,一只曾祖代雞能產(chǎn)出24萬只商品雞,也就是如果一只曾祖代種雞感染,會造成數(shù)萬只商品雞感染,經(jīng)濟(jì)損失可想而知。”面對這一重疫病,崔治中和團(tuán)隊人員憂心忡忡。

  為此,崔治中團(tuán)隊連續(xù)多年收集保存各亞群禽白血病病毒共200余株,建立了系統(tǒng)完善的資源庫,由此也創(chuàng)新性地揭示了我國J病毒的分子演變規(guī)律,“翻出”了禽白血病病毒的“家底”。

  堵住病毒“進(jìn)口”

  找到元兇,下一步就是控制,但我國的曾祖代或者祖代種雞幾乎都從國外進(jìn)口,如何通過對進(jìn)口種雞進(jìn)行檢測以從源頭上避免帶進(jìn)J病毒?“在當(dāng)時,全世界都沒有針對這個新型病毒的檢測試劑。”崔治中感嘆道。

  模擬抗原是*道難關(guān),正當(dāng)團(tuán)隊一籌莫展時,另一種病毒吸引了科研人的視線。“當(dāng)時昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)剛剛興起,因為其所表達(dá)的蛋白含量高,且它作為真核表達(dá)系統(tǒng)能更好的模擬抗原。”崔治中說,通過該病毒表達(dá)系統(tǒng)為載體,很快表達(dá)出了J病毒的抗原蛋白,“緊接著,我們研制出了針對該病毒的單克隆抗體,并利用這一單克隆抗體在熒光顯微鏡下觀察到病毒的存在,建立了可用于檢測J病毒的間接免疫熒光檢測方法。”

  間接免疫熒光檢測方法現(xiàn)在是一種非常常規(guī)的檢測方法,“但當(dāng)時在獸醫(yī)學(xué)的應(yīng)用較少。”團(tuán)隊成員趙鵬對檢測方法過程科普道,我們檢測時在所取樣品中加入針對J病毒的單克隆抗體,而這種抗體只會與J病毒結(jié)合,然后再加入熒光素標(biāo)記物,如果抗體已與病毒結(jié)合,則在專用熒光顯微鏡下就能看到病毒感染部位發(fā)出紅色或綠色的熒光,若沒有結(jié)合就不會看到光亮,由此判定細(xì)胞中是否存在病毒感染。整個過程簡單、易操作。

  在實踐中,新的診斷技術(shù)也讓國內(nèi)禽類企業(yè)如虎添翼的同時,保證了雞禽的質(zhì)量。

  北京愛拔益加家禽育種有限公司等四家公司此前一直從國外進(jìn)口AA、ROSS品系祖代肉雞種苗,在意識到了禽白血病病毒危害的嚴(yán)重性后,運用間接免疫熒光檢測方法,在堵住禽白血病從國外到國內(nèi)的“進(jìn)口”的同時,這三家公司的種雞群很快就實現(xiàn)了禽白血病“零發(fā)生”。直到現(xiàn)在這些企業(yè)仍然是國內(nèi)種禽行業(yè)的龍頭企業(yè)。

  凈化國內(nèi)“土著雞”

  禽白血病“進(jìn)口”堵住了。然而之前隨進(jìn)口種雞帶入的該禽白血病病毒,已傳進(jìn)了我國幾乎所有自繁自養(yǎng)的蛋雞和黃羽肉雞等原種雞群。在沒有有效藥物或疫苗情況下,如何在這些“土著”雞群中快速、徹底凈化禽白血病病毒?

  考慮到該病毒垂直傳播的特點,研究團(tuán)隊打算通過對種雞群進(jìn)行檢測后淘汰帶毒病雞的方式進(jìn)行凈化。然而,在家禽的哪個生長階段檢測?取雞體中的什么樣品?這些又成為在研究中必須攻克的“山頭”。

  適合我國原種雞場的禽白血病凈化集成規(guī)程此時出現(xiàn)了,解決了上述難題。該方法可在種雞生長的幾個關(guān)鍵期進(jìn)行病毒檢測后,徹底淘汰帶禽白血病病毒的雞。規(guī)程中的檢測樣品包括:在種蛋孵化出殼時,技術(shù)人員采集所有雛雞胎糞;在育雛后期,采集所有雞的血液;在開產(chǎn)初期和留種前,采集所有雞的血液和公雞精液。

  “由于種蛋出殼時的雛雞*易感染病毒,病毒可能會橫向感染其他剛出殼的雛雞,想徹底清除病毒樣本必須檢測胎糞。”趙鵬表示,除此之外,還因為“胎糞檢測結(jié)果不僅可以反映這只雞的感染狀態(tài),還能盡量減少對雛雞的應(yīng)激。從雞出殼8至10周齡時為育雛期,這個時期需要較高的溫度和營養(yǎng),要飼養(yǎng)在專門的育雛舍中,應(yīng)激反應(yīng)越小越好。”

  *后,為了防止漏檢,在種雞育雛后期由育雛舍轉(zhuǎn)入育成舍時還要檢測,不把病毒帶入新雞舍,在開產(chǎn)初期和留種前,也就是雞要“生孩子”時再進(jìn)行*后把關(guān)。

  打破誤區(qū) 做到“不留死角”

  此前國際禽病界和家禽育種公司一直認(rèn)為由于精子的自我校正機(jī)制等原因,禽白血病病毒并不感染精子,而公雞和母雞直接接觸才會傳染,認(rèn)為在生產(chǎn)中普遍采用人工授精的方式,不會造成禽白血病的感染。“我們證明了種公雞可經(jīng)精液將病毒傳染給母雞,并由此垂直傳播至下一代。”趙鵬說。

  “在實施禽白血病凈化過程中發(fā)現(xiàn),用感染禽白血病的公雞精液為正常母雞人工授精后,其后代群體中仍有禽白血病感染現(xiàn)象的發(fā)生。”崔治中說,由此我們開始懷疑公雞的精液是否也會將禽白血病病毒傳染給母雞?

  一系列試驗立刻進(jìn)行,通過給雞胚靜脈接種J病毒,待其孵化后找到感染病毒的公雞,再等它們性成熟后采集精液給母雞做人工授精,*后檢測母雞是否感染,并將該母雞產(chǎn)的蛋孵化小雞,對其進(jìn)行病毒分離,結(jié)果顯示,這種方式孵化出的小雞體內(nèi)也可以檢測出禽白血病病毒。“精液中的成分是很復(fù)雜的,精子只是其中一小部分,精子不感染病毒不代表精液中沒有病毒。”趙鵬表示,試驗數(shù)據(jù)證實了他們的懷疑是正確的,并進(jìn)一步挖掘出新的“真相”:公雞即使血液中沒有檢測到禽白血病病毒,但精液中卻仍可以檢測到這個病毒。新出爐的對公雞精液實施病毒分離檢測的*操作流程在眾多雞禽類企業(yè)試驗后,數(shù)據(jù)顯示雞群的禽白血病感染率進(jìn)一步下降。

  “過去國際上一直忽略公雞在禽白血病傳播中的作用,漏檢了很多帶病種公雞,所以西方國家需用7至10年甚至更長的時間才能完成凈化。而運用了新技術(shù),只需3至5年就能徹底凈化原種雞場內(nèi)的禽白血病毒。”趙鵬表示。

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